（二）对砒霜中毒死亡小鼠脏器砷种态的转换分布分析

选7只体重相近的小鼠，3只作为空白对照， 4只以砒霜溶液灌胃，灌胃砒霜溶液分两种，浓度分别为2.7 mg/mL（小鼠1和小鼠2）和2.0mg/mL（小鼠3和小鼠4），第一天灌0.1mL，第二天灌0.5mL，约3h后死亡，取4只小鼠胃及其胃容物进行分析，结果列于表11。另外，取小鼠1的肝脏及心脏合并匀浆，小鼠3也同样处理，再放置不同时间，研究不同种态的砷随时间而转换，结果列于表12。

表11 砒霜急性中毒死亡小鼠胃及其内容物中As的分布（μg/g）

组别 三价砷 五价砷 甲基砷 三价砷，％
第一件衣物 4.23 85.4 5.99 4.37
第二件衣物 9.67 48.4 38.5 3.48
第四件衣物 29.3 56.6 13.9 0.22
灌胃砒霜溶液 2112.3 — — 100
空白组(n=3) — — — —
中毒组(n=4) 小鼠1 27.8 0.923 — 96.8
中毒组(n=4)小鼠2 59.2 0.611 — 99.0
中毒组(n=4)小鼠3 91.166 0.903 — 99.0
中毒组(n=4)小鼠4 27.8 0.923 — 96.8


表12小鼠肝脏及心脏中不同种态的砷随时间转换结果（μg/g）

样品名称 三价砷 五价砷 二甲基胂 检测时间 含量 ％
砒霜2小鼠1 0.832 26.7 1.354 0.926 死亡时
砒霜2小鼠10.055 1.88 2.840 0.0288 死后11天
砒霜2小鼠1— — 3.157 0.082 死后24天
砒霜1小鼠5 0.957 47.6 0.128 0.925 死亡时
砒霜1小鼠50.238 11.5 1.710 0.119 死后11天
砒霜1小鼠5— — 2.216 0.043 死后24天

由表11可见，砒霜急性中毒死亡小鼠胃容物中，虽有少量三价砷转变为五价砷和二甲基砷，但三价砷仍占绝大多数（96％以上）。表12中的动物实验结果表明砒霜的三价砷所占的比例随时间的推移逐渐降低，五价砷随之增高，五价砷即由三价砷转换。由此推断光绪帝胃肠内容物中三价砷的比例，在死时(100年前)远不止29.3%。可以断定，光绪帝胃肠内容物中三价砷和五价砷均来自于砒霜。

（三）对光绪帝尸体中砒霜总量的测算

人体中的砒霜总量是判断受体是否会中毒死亡的重要依据。根据相关研究【5﹣8】，人口服砒霜（三氧化二砷）60—200毫克就会中毒死亡。因受检材条件限制，难以准确测算光绪帝尸体中的砒霜总量，只能通过对其遗留在头发上和衣物上的部分砒霜量值进行测算，由此得知光绪帝尸体中的砒霜总量不会低于此值。结果见表13。

表13清光绪帝第四件衣物及残渣、头发残渣中砒霜测算值

样品名称及样品数 平均砷浓度，μg/g 样品重量，g 砷含量，mg 砒霜量，mg
第 四 件 衣 物
左袖（n＝5） 359 69 24.8 32.7
右袖（n＝6） 879 90 79.1 104.4
躯干（n＝4） 448 88 39.4 52.0
残渣（n＝2） 1205 3.63 4.4 5.8
头发残渣（n＝2） 3237 1.535 5.0 6.6

由表13可知，仅光绪帝头发残渣、第四件衣物及其残渣中的砒霜总量就高达约201.5 mg。

结论

本课题在不能开棺直验且时隔久远、检材条件很差等不利因素困扰下，由光绪帝发砷研究入手，通过对其头发不同截段砷含量的异常分布情况的分析验证，发现并证实了导致其违背常规的砷元素分布的特殊原因，即光绪帝头发上的高含量砷并非为慢性中毒自然代谢产生，而是来自于外部沾染。通过对其殡葬衣物被侵蚀的规律以及衣物上砷元素含量的分布情况分析，进一步证实了光绪帝的腐败尸体是砷元素污染的唯一来源。由砷种态分析得知，光绪帝遗骨、头发、衣物中高含量的砷化合物为剧毒的三氧化二砷，即砒霜；经过科学测算，光绪帝摄入体内的砒霜总量明显大于致死量。因此，研究结论为：光绪帝系砒霜中毒死亡。